شماره شناسایی
|
:
|
18867483
|
شماره مدرک
|
:
|
۵۹۸۴۴
|
شناسه افزوده
|
:
|
مدیرروستا، حسین
|
|
:
|
محرمی، مجتبی
|
|
:
|
شاهعلی، یوسف
|
|
:
|
شجاعی، محمد
|
|
:
|
طهوری، فاطمه
|
|
:
|
نظری، علی
|
|
:
|
دادار، مریم
|
|
:
|
مژگانی، ناهید
|
عنوان اصلي
|
:
|
تخليص و ارزيابي ملتين زهر زنبور عسل استحصال شده از استان هرمزگان
|
عنوان اصلي به زبان ديگر
|
:
|
:Purification and evaluation of melittin from honey bee venom extracted from Hormozgan province
|
صفحه شمار
|
:
|
۵۴ ص.:مصور، عکس(رنگی)، جدول، نمودار
|
وضعیت انتشار
|
:
|
کرج: موسسه تحقيقات واكسن و سرم سازي رازي ، ۱۳۹۹
|
فروست
|
:
|
شماره ثبت ۵۹۸۴۴ مورخ ۱۴۰۰/۰۴/۱۳۵۹۸۴۴
|
|
:
|
شماره طرح ۹۶۰۵۹۶۱۱۹۸-۹۶۰۵۵-۱۲۶-۱۸-۱۸-۰۱
|
|
:
|
شماره نامه: سامانه سمپات
|
|
:
|
این طرح: مقدماتی است
|
خلاصه یا چکیده
|
:
|
زنبورعسل حشره¬اي با ارزش و با فرآورده¬هاي بسيار مهم و پرکاربرد است. يکي از مهم¬ترين فرآورده¬هاي آن، زهر زنبورعسل است که امروزه کاربردهاي درماني آن در بخش¬هاي مختلفي مشخص شده است. تا بحال موارد متعددي از کاربرد اين فراورده در زمينه¬هاي درماني گزارش شده است. مطالعات نشان داده که دليل اصلي اين خواص حضور ترکيب پپتيدي به نام مليتين در زهر زنبور عسل مي¬باشد. اين مطالعه با هدف بررسي ميزان مليتين مستخرج از زهر زنبور عسل از منطقه فارس و ميزان اثرگذاري آن بر رده سلول-هاي سرطاني مختلف مي باشد. روش بررسي: زهرگيري با استفاده از دستگاه مخصوص انجام شد. مليتين موجود در نمونه زهرخام با استفاده از کروماتوگرافي مايع با کارايي بالاي-فاز معکوس RP-HPLC استخراج گرديد و ميزان درصد آن در نمونه تعيين شد. آناليز فراکشن مليتين توسط SDS-PAGE خالص بودن آن را تاييد نمود. اثر مهاري اين پپتيد بر تکثير و ميزان حيات سلول¬هاي سرطاني رده AGS، A549، HepG2، Panc-1، DLCL-2، Ht-29 و سلول¬هاي نرمال پوستي بررسي شد. براي اين منظور رده سلولي مورد نظر در پليت 96 خانه کشت داده شد. سپس در مجاورت غلظت¬هاي مختلف مليتين تيمار گرديد و در انتها حيات سلول¬ها با روش MTT در طول موج 560 نانومتر تعيين شد. اثرگذاري نمونه¬هاي خالص شده مليتين هم با همين روش و بر روي تمامي اين رده¬هاي سلولي مورد بررسي قرار گرفت. جزء مهم ديگر موجود در زهر زنبور عسل، آنزيم فسفوليپاز A2 است. ميزان فعاليت اين آنزيم با استفاده از کيت اندازه گيري شد.همچنين اثر هموليتيک زهر طبق پروتکل badri Al مورد بررسي قرار گرفت. و در نهايت توالي پپتيدي در مقايسه با نمونه استاندارد سيگما، از طريق طيف بيني جرمي بررسي شد.نتيجه گيري: کروماتوگرام ها نشان مي¬دادند که ترکيب نمونه¬هاي زهر خام در دو فصل پاييز و بهار در مقدار گونه¬هاي موجود از جمله مليتين و فسفوليپاز متفاوتند. از نظر درصد مليتين به ترتيب 9/63 و 3/43 درصد از زهر خام را تشکيل مي-دهد. از نظر فعاليت آنزيم فسفاليپاز، نمونه فصل پاييز فعال¬تر از نمونه فصل بهار است ( به ترتيب µmol/min/ml 24/0 و 66/0). در مورد اثر گذاري بر رده¬هاي سلولي، نمونه زهر خام هر دو فصل بر روي رده¬هاي سلولي حتي با غلظت 5 ميکروگرم در چاهک، اثر قابل توجهي بر رده¬هاي سلولي داشته و ميزان چشمگيري از سلول¬ها را از بين مي¬برد. اين نتايج براي نمونه¬هاي مليتين خالص شده هم به همين شکل بوده و در اکثر رده¬هاي سلولي، نمونه مليتين خالص شده فصل بهار اثر بيشتري داشته و درصد بالاتري از سلول¬ها را از بين مي¬برد.
|
|
:
|
Honey bee (Apis mellifera) is one the most valuable insect in the world that alongside of its honey has other important products. Bee venom as the most significant product of this insect is being used in therapeutic like as effects on cancer cell lines. There are varying reports of Bee venom effect on diseases. Studies have shown that the main component of this venom is melittin, a peptide including 26 Amino acid with 2846 Da weight. The purpose of this study was to determine the amount of melittin in two seasons, spring and autumn, from Mazandaran province, Iran. The next step assignment was comparing the amount of effect of pure melittin and crude venom from Mazandaran district on different cancer cell lines.Methods: Venom collecting was performed using a special device. The amount of melittin in the venom was assessed by RP-HPLC. Analysis of melittin fraction was confirmed by SDS-PAGE. The inhibitory influence of pure melittin and crude venom on the proliferation and viability of AGS, A549, HepG2, 1-Panc, 2-DLCL, and 29-Ht and normal skin cells was investigated. For this purpose, the chosen cell lines were cultured in 96 microplate. Then each plate was treated with a range of crude venom concentrations. Cell viability was determined by MTT method at a wavelength of 560 nm. The effect of purified melittin samples on all these cell lines was also examined by the same method. Another important component of bee venom is phospholipase A2 that was assayed in a kinetic method.Conclusion: chromatogram was shown that crude venom in two season was different. Melittin in autumn and spring was 63.9 and 43.3 respectively. In tems of phospholipase enzyme, it was more active in autumn(0.66autumn, 0.24 spring). Effectiveness of crude venom on cell line mortality was same in both season. And also melittin of spring more effective than autumn.
|