|
" شناسایی انواع Microsporidia آلوده کننده‌ی کرم ابریشم (Nosema، Vairomorpha وPleistophora) با استفاده از تکنیک‌های میکروسکوپی SEM و TEM "
| شماره شناسایی
|
:
|
18870965
|
| شماره مدرک
|
:
|
۶۰۷۰۴
|
| نام عام مواد
|
:
|
[گزارش نهایی -ویژه]
|
| شناسه افزوده
|
:
|
محرمی، مجتبی
|
|
|
:
|
نعمت‌ا‌للهیان، شهلا
|
|
|
:
|
باقری، معصومه
|
|
|
:
|
عبدی‌گودرزی، محمد
|
|
|
:
|
کامران، اسماعیل
|
|
|
:
|
مديرروستا، حسین
|
|
|
:
|
خيرخواه رحيم‌آباد، یوسف
|
|
|
:
|
ترکمن، مریم
|
|
|
:
|
بیابانی، محمدرضا
|
| عنوان اصلي
|
:
|
شناسایی انواع Microsporidia آلوده کننده‌ی کرم ابریشم (Nosema، Vairomorpha وPleistophora) با استفاده از تکنیک‌های میکروسکوپی SEM و TEM
|
| عنوان اصلي به زبان ديگر
|
:
|
:Detection of microsporidia species responsible for silkworm infection (Nosema, Vairomorpha and Pleistophora) using TEM and SEM microscopic techniques
|
| صفحه شمار
|
:
|
۴۳ ص.:مصور(عکس‌رنگی)، جدول
|
| وضعیت انتشار
|
:
|
کرج: موسسه تحقیقات واکسن و سرم‌سازی رازی، ۱۴۰۰
|
| فروست
|
:
|
شماره ثبت ۶۰۷۰۴ مورخ ۱۴۰۰/۰۹/۱۱۶۰۷۰۴
|
|
|
:
|
شماره طرح ۹۷۰۹۹۱-۰۵۸-۱۸۲۴-۱۸-۳
|
|
|
:
|
شماره نامه: سامانه سمپات
|
|
|
:
|
این طرح بنیادی است
|
| خلاصه یا چکیده
|
:
|
بیماری پبرين به عنوان مهمترين و خطرناکترين بيماری تک‌یاخته‌ای کرم ابريشم، در سالهای اخیر لطمه اقتصادي فراواني به صنعت ابریشم وارد کرده است. از آنجایی که بیماری پبرین با انتقال از اسپور به صورت افقی و عمودی منتشر می شود، مبارزه و حذف کامل آن از تولیدات نوغانداری با مشکلات زیادی همراه شده است و هر سال این بیماری باعث از دست رفتن مقادیر قابل توجهی تخم نوغان تولیدی می شود. با توجه به اینکه در حال حاضر تنها روش تشخیص بیماری پبرین در کشور روش میکروسکوپ نوری بوده و این روش از دقت بالایی برخوردار نیست، لذا، در این تحقیق برای شناسایی دقیق مورفولوژیکی اسپورهای پوروتوزآیی عامل بیماری پبرین از روش میکروسکوپ های الکترونی انتقالی (TEM) و اسکن(SEM) ، استفاده شد. ابتدا از مزارع مختلف (پرند، پرنیان، شفت و مرکز تحقیقات ابریشم) نمونه های لارو و پروانه آلوده جمع آوری شده و سپس با استفاده از روش شیب گرادیانت غلظت سوکروز، اسپورها تخلیص شدند. از هر یک از مناطق تعداد 20 نمونه برای روش SEM و 10 نمونه برای روش TEM تهیه شد. همچنین یک آزمایش پرورش لاروها با پاشش اسپورهای تخلیص شده از مطالعه حاضر، در حضور گروه شاهد به منظور بررسی علایم بیماری در شرایط کنترل شده انجام شد. نتایج تصاویر اسپورهای نمونه برداری شده از مزارع مختلف، با بزرگنمایی های X20000 تا X30000 نشان داد که میانگین طول و عرض اسپورها به علاوه انحراف استاندارد در زیر میکروسکوپ الکترونی اسکن به ترتیب بین 25/0± 99/1 و 32/0±81/2 میکرو متر بود. با توجه به نتایج تحقیقات دیگر محققین، اندازه اسپورهای مورد مطالعه در این پژوهش، نسبت به اسپورهای Nosema bombycis کلاسیک عامل بیماری پبرین، کوچکتر بود. علاوه بر این، شیار فرورفتگی اسپورها از جنس و گونه های دیگر عمیقتر و شبیه به گونه Nosema bombycis در مطالعات دیگر بود. برای TEM، علی رغم تکرار آزمایش در مراکز مختلف میکروسکوپ الکترونی، به علت پایین بودن وضوح عکسها، تعداد کویل ها در اسپور به وضوح نشان داده نشد اما، نتایج عکسبرداری TEM از نمونه های مورد مطالعه نشان داد که چرخه زندگی گونه معرفی شده شامل دو مرحله مشخص اسپور و رویشی بود. بررسی میزان بیماریزایی و علایم بیماری برای اسپورهای مورد مطالعه نشان داد که علایم بیماری در شرایط کنترل شده با علایم بیماری در مزارع نمونه برداری شده مطابقت داشته و مهمترین علامت در لاروهای سن چهارم و پنجم ریز ماندن و عدم رشد لاروهای گروه تیمار نسبت به گروه شاهد بود. یافته های این مطالعه نشان داد که گونه مورد بررسی یک سویه بومی از Nosema bombycis و مخصوص ایران است که اندازه و خصوصیات دیگر آن منحصر به فرد بوده و برای اولین بار در این مطالعه معرفی شد.کلید واژه: کرم ابریشم، بیماری پبرین، Nosema bombycis، SEM، TEM
|
|
|
:
|
Pebrine disease as the most important and dangerous protozoal disease of silkworm, has caused tremendous economic losses in the silk industry in recent years. Since, Pebrine disease spreads horizontally and vertically by transmission from spores, it is too difficult to eradicate it from sericulture and silk industries, and every year this disease causes the loss of significant amounts of sericultural products. Given that, the only method of diagnosing Pebrine disease in the country is the light microscope method, which does not have high accuracy; therefore, in this study, transmission electron microscopy (TEM) and scanning electron microscopy (SEM) methods were used for accurate morphological identification of the protozoa spores causing Pebrin disease. Infected larvae and mother moth samples were collected from different farms (Parand, Parnian, Shaft and Silk Research Center) and then, the spores were purified using the sucrose gradient method. From each region, 20 and 10 samples were prepared for SEM and TEM, respectively. Also, a larval rearing experiment was performed by spraying the purified spores obtained from the present study along with a control group to evaluate the symptoms of the disease in experimental conditions. SEM Results showed that the average length and width of spores ranged from 1.99 ± 0.25 to 2.81 ± 0.32 μm, respectively for magnifications of 20,000 X to 30,000 X. In this research, results demonstrated that the size of spores was smaller than the Nosema bombycis as the classic species causing pebrine disease. In addition, the grooves of the spores were deeper than those of other Nosema species and more similar to Nosema bombycis in other studies. For TEM, despite repeating the experiment for several times in different electron microscopy centers, due to the low resolution of the device, results didn’t show the number of coils inside the spores, clearly. However, it showed that the life cycle included two distinct stages; spore and vegetative. Examination of pathogenicity and disease symptoms for the studied spores indicated that the disease symptoms in controlled conditions were similar to the disease symptoms in the sampled farms, and the most important symptom in fourth and fifth age larvae was the small size and no growth of larvae in the treatment group compared with control group. Findings showed that the studied species was a native strain of Nosema bombycis and specific to Iran, whose size and other characteristics were unique and was introduced for the first time in this study.Key words: Pebrine disease, Silkworm, Nosema bombycis، SEM، TEM
|
| |