رکورد قبلیرکورد بعدی

" امكان سنجی تهيه كشت سلولی اوليه از بافتهای باله و کلیه بچه‌ماهی سفید دریای خزر(Rutilus kutum) "


شماره شناسایی : 18864528
شماره مدرک : ۵۸۲۲۷
نام عام مواد : [گزارش نهایی -ویژه]
شناسه افزوده : قاسمی، محدث
: جلیل ذریه‌زهرا، محمدابراهیم
: حقيقی‌کارسيدانی، سمیه
: رمضانی‌عاقله، بابک
: امیدوار، صادق
: شاهرخی، سوسن
: ظهماسبی، نوشین
: نصیری، شکوفه
: پورعباس تحويلداری، ناهید
: رضوانی گيل‌کلائی، علیرضا
: صفوی، ابراهیم
: توکل، عباس
عنوان اصلي : امكان سنجی تهيه كشت سلولی اوليه از بافتهای باله و کلیه بچه‌ماهی سفید دریای خزر(Rutilus kutum)
عنوان اصلي به زبان ديگر : :Study on the possibility of preparation of primary cell culture from fin and kidney tissues of Rutilus kutum fingerlings
صفحه شمار : ۱۲۱ ص.:مصور، عکس(رنگی)، نمودار
وضعیت انتشار : تهران: موسسه تحقیقات علوم شیلاتی کشور، پژوهشکده آبزی‌پروری آبهای داخلی، [۱۳۹۹]
فروست : شماره ثبت ۵۸۲۲۷ مورخ ۱۳۹۹/۰۶/۲۶
: شماره طرح ۹۶۱۳۱۶-۰۶۰-۱۲-۷۳-۲۴
: شماره نامه: سامانه سمپات
: این طرح: بنیادی است
: ۵۸۲۲۷
شماره ثبت : ۴۳۸۲
خلاصه یا چکیده : کشت سلول این امکان را فراهم می¬آورد تا تغییرات و آثار آسیب سلولی در محیط کنترل شده مورد بررسی قرار گیرند. در این مطالعه که در سال 1396 انجام شد امکان تهيه كشت سلول اوليه از باله و کلیه ماهی سفید دریای خزر(Rutilus kutum) به دو روش کاشتن(Explant) با دو تيمار (تيمار با آنزيم و بدون آنزيم تريپسين) و جداسازی آنزیمی با دو تيمار(استفاده و بدون استفاده از همزن مغناطيسي) مورد بررسی قرار گرفت. بدین منظور پس از طی مراحل شستشو و ضدعفونی، سلول ها در محیط کشت L-15 حاوی20 درصد سرم جنین گوساله و آنتی بیوتیک در فلاسک های کشت سلول cm2 25 کاشته شدند. در روش آنزیمی با استفاده از همزن قطعات بافت با ظرفی حاوی تریپسین بر روی استیرر قرار گرفته ولی در روش بدون همزن قطعات بافت بر روی استیرر قرار نمیگرد، در انتها در هر دو روش بافت ها سانتریفیوژ شده و در فلاسک های کشت سلول کاشته میشوند. سپس بعد از گذشت 7 الی 10 روز زمانی که سلول ها 70 درصد کف فلاسک را پوشاندند در هر دو روش اقدام به پاساژ سلول ها گردید، سلول ها توسط 3 سی سی آنزیم تریپسین از کف فلاسک جدا شدند و پلیت سلولی حاصل به فلاسک کشت جدید منتقل شد. در مقایسه کلی بین روش های تولید کشت اولیه، روش جداسازی آنزیمی توسط آنزیم تریپسین با استفاده از همزن مغناطیسی موفق تر بود و نتايج نشان داد شرايط بهينه براي كشت اوليه سلولهاي باله و کلیه ماهي سفيد محیط کشت L-15 به همراه 20 درصد سرم جنین گوساله، 2/pH ، 7 و دمای 24 درجه¬ی سانتی گراد مي باشد. تا کنون 12پاساژ از سلول هاي باله ماهي سفيد انجام شده و سلول ها از رشد خوبی نیز برخوردار هستند. با توجه به تکثیر و پاساژ مناسب سلول های بدست آمده میتوان از این کشت سلولی برای تحقیقات ویروس شناسی، سم شناسی و ایمنی شناسی استفاده کرد، اما سلول های کلیه علی رغم مهاجرت سلول 37 /88 درصد، تا 5 پاساژ تکثیر شدند و پس از آن تکثیر مناسبی صورت نگرفت.واژگان کلیدی: کشت سلول اولیه، باله، کلیه، ماهی سفید دریای خزر
: Cell culture method allows investigating of the cytopathic effects and cell changes in controlled environments. In this study, preparation of primary cell culture from the Caspian Kutum (Rutilus kutum) was investigated by explantation method with two trials (with and without trypsin treatment) and enzymatic disaggregation with two trials (with and without using Magnetic stirrer). For this purpose, after washing and disinfection steps, tissue particles were explanted and the cells derived from fin and kidney of kutum were seeded in L-15 medium containing 20% Fetal Bovine Serum and antibiotic in 25 cm2 cell culture flasks. After 7-10 days, the cells were passaged when they covered 70% of the bottom of the flask and the cells were separated from the flask by 3 cc trypsin enzyme then were transferred to a new culture flask. However it was concluded that enzymatic disaggregation using the Magnetic stirrer was the most efficient technique to isolate cells and develop confluent cultures. The highest growth was obtained in L-15 medium with 20% Fetal Bovine Serum, pH 7.2 and 24 ° C. So far, 12 passages have been performed and the cells have been well developed. Due to the proper proliferation and passage of the cells, this cell culture can be used for virology, toxicology and immunology research. But the kidney primary cells in spite of the 5 passages did not continue normal growth and their cultivation were stopped.Key words: primary cell culture, Fin, Kidney, Rutilus kutum
آدرس ثابت

پیشنهاد خرید
پیوستها
عنوان :
نام فایل :
نوع عام محتوا :
نوع ماده :
فرمت :
سایز :
عرض :
طول :
موجودی
موسسه تحقیقات علوم شیلات کشور- تهران
نمایش کامل جزئیات | عدم نمایش جزئیات
جزئیاتمحل نگهداریشماره ثبتشناسه بازیابیجلدوضعيتتاريخ برگشت
موسسه تحقيقات علوم شيلاتي کشور ۴۳۸۲س ۴۲۲۰موجود‭‬
نظرسنجی